Переключаемость: Переключаемость — это… Что такое Переключаемость?

Переключаемость — это… Что такое Переключаемость?

Переключаемость
переключа́емость

ж.

Способность переключаться.

Толковый словарь Ефремовой. Т. Ф. Ефремова. 2000.

.

  • Перекличка
  • Переключатель

Смотреть что такое «Переключаемость» в других словарях:

  • переключаемость — переключ аемость, и …   Русский орфографический словарь

  • ПЕРЕКЛЮЧАЕМОСТЬ ВНИМАНИЯ, ПЕРЕКЛЮЧЕНИЕ ВНИМАНИЯ — сознательное и осмысленное перемещение внимания с одного объекта на другой, способность быстро ориентироваться в сложной изменяющейся ситуации …   Профессиональное образование. Словарь

  • переключаемость внимания — качество внимания, заключающееся в возможности его произвольного или непроизвольного переноса с одного обьекта (или группы обьектов) на другой …   Энциклопедический словарь по психологии и педагогике

  • Переключаемость внимания — способность осмысленно и сознательно перемещать внимание с одного объекта на другой …   Психология человека: словарь терминов

  • ВНИМАНИЯ ПЕРЕКЛЮЧАЕМОСТЬ — перевод внимания с одного объекта на другой, с одного вида деятельности на иной; В. п. может быть непроизвольной и произвольной …   Психомоторика: cловарь-справочник

  • Внимание — Внимание  избирательная направленность восприятия на тот или иной объект. Изменение внимания выражается в изменении переживания степени ясности и отчетливости содержания, являющегося предметом деятельности человека. Внимание находит себе… …   Википедия

  • ригидность — (от лат. rigidus  твёрдый), 1) (физиол.) функциональное состояние скелетных мышц, выражающееся в чрезмерной их напряжённости (сократившись, мышцы длительное время остаются твёрдыми). Возникает при некоторых нарушениях деятельности центральной и… …   Энциклопедический словарь

  • Внимательность — ВНИМАНИЕ  избирательная направленность на тот или иной объект, сосредоточение на нем. Наиболее известно определение, которое дал вниманию Уильям Джеймс: «Каждый знает, что такое внимание. Это когда разум охватывает в ясной и отчетливой форме… …   Википедия

  • Внимание —     направленность и сосредоточенность психической деятельности на одни предметы или явления при одновременном отвлечении от других. В. динамическая характеристика деятельности, её необходимая сторона. Объектом В. могут выступать как воздействия… …   Педагогический терминологический словарь

  • внимание — сосредоточенность деятельности субъекта в данный момент времени на каком либо реальном или идеальном объекте (предмете, событии, образе, рассуждении и т. д.). Выделяют три вида В. Наиболее простым и генетически исходным является непроизвольное В …   Большая психологическая энциклопедия

Основные свойства внимания

Поскольку наличие внимания означает связь сознания с определенным объектом, его сосредоточенность на нем, прежде всего встает вопрос о степени этой сосредо­точенности, т. е. о концентрированности внимания.

Концентрированностъ внимания — в противоположность его распыленно­сти — означает наличие связи с определенным объектом или стороной дея­тельности и выражает интенсивность этой связи. Концентрация — это сосре­доточенность, т. е. центральный факт, в котором выражается внимание. Концентрированность внимания означает, что имеется фокус, в котором собрана психическая или сознательная деятельность.

Наряду с этим пониманием концентрации внимания под концентрирован­ным вниманием часто в психологической литературе понимают внимание ин­тенсивной сосредоточенности на одном или небольшом числе объектов. Концентрированность внимания в таком случае определяется единством двух при­знаков — интенсивности и узости внимания.

Объединение в понятии концентрации интенсивности и узости внимания исходит из той предпосылки, что интенсивность внимания и его объем обратно пропорциональны друг другу. Эта предпосылка в общем правильна, лишь ког­да поле внимания состоит из элементов, друг с другом не связанных. Но когда в него включаются смысловые связи, объединяющие различные элементы меж­ду собой, расширение поля внимания дополнительным содержанием может не только не снизить концентрированности, но иногда даже повысить ее. Мы по­тому определяем концентрацию внимания только интенсивностью сосредото­чения и не включаем в нее узости внимания. Вопрос об объеме внимания, т. е. количестве однородных предметов, которые охватывает внимание, — особый вопрос.

Для определения объема внимания пользовались до сих пор главным образом тахистоскопическим методом. В тахистоскопе на короткое, точно измеряемое время выставлялись подлежащие наблюдению экспонаты, как-то: буквы, цифры, фи­гуры.

Согласно ряду исследований, обнаруживших при этом существование до­вольно значительных индивидуальных различий в объеме внимания, объем внимания взрослого человека достигает в среднем примерно до 4—5, макси­мум 6 объектов; у ребенка он равен в среднем не более 2—3 объектам. Речь при этом идет о числе друг от друга не зависимых, не связанных между собой объектов (чисел, букв и т. п.). Количество находящихся в поле нашего внима­ния связанных между собой элементов, объединенных в осмысленное целое, может быть много больше. Объем внимания является поэтому изменчивой ве­личиной, зависящей от того, насколько связано между собой то содержание, на котором сосредоточивается внимание, и от умения осмысленно связывать и структурировать материал. При чтении осмысленного текста объем внимания может оказаться существенно отличным от того, который дает его измерение при концентрации на отдельных осмысленно между собой не связанных эле­ментах. Поэтому результаты тахистоскопического изучения внимания на от­дельные цифры, буквы, фигуры не могут быть перенесены на объем внимания в естественных условиях восприятия связанного осмысленного материала. В практике, в частности педагогической, школьной, следовало бы, тщательно учитывая доступный учащимся объем внимания, не создавая в этом отношении непосильной перегрузки, расширять объем внимания, систематизируя предъяв­ляемый материал, вскрывая его взаимосвязи, внутренние отношения.

С объемом внимания тесно связана и распределяемость внимания. Говоря об объеме, можно, с одной стороны, подчеркивать ограничение поля внимания. Но оборотной стороной ограничения, поскольку оно не абсолютно, является распределение внимания между тем или иным числом разнородных объектов, одновременно сохраняющихся в центре внимания. При распределении внима­ния речь, таким образом, идет о возможности не одного, а много-, по крайней мере двухфокального внимания, концентрации его не в одном, а в двух или большем числе различных фокусов. Это дает возможность одновременно со­вершать несколько рядов действий и следить за несколькими независимыми процессами, не теряя ни одного из них из поля своего внимания. Наполеон мог, как утверждают, одновременно диктовать своим секретарям семь ответствен­ных дипломатических документов. Некоторые шахматисты могут вести одно­временно с неослабным вниманием несколько партий. Распределенное внима­ние является профессионально важным признаком для некоторых профессий, как, например, для текстильщиков, которым приходится одновременно следить за несколькими станками. Распределение внимания очень важно и для педаго­га, которому нужно держать в поле своего зрения всех учеников в классе.

Распределение внимания зависит от ряда условий, прежде всего от того, насколько связаны друг с другом различные объекты и насколько автоматизи­рованы действия, между которыми должно распределяться внимание. Чем тес­нее связаны объекты и чем значительнее автоматизация, тем легче совершается распределение внимания. Способность к распределению внимания весьма уп­ражняема.

При определении концентрированности и объема внимания необходимо учи­тывать не только количественные условия. Из качественных моментов, в част­ности, один играет особенно значительную роль: связность смыслового содержания. Внимание — как и память — подчиняется раз­личным законам, в зависимости от того, на каком матери­але оно осуществляется. Очень рельефно это сказывает­ся на устойчивости внимания.

Устойчивость внимания определяется длительностью, в течение которой сохраняется концентрация внимания, т. е. его временной экстенсивностью. Экспериментальное исследование показало, что внимание первично подверже­но периодическим непроизвольным колебаниям. Периоды колебаний внимания по данным ряда прежних исследова­ний, в частности Н. Ланге, равны обычно 2—3 сек., доходя максимум до 12 сек. К колебаниям внимания относились, во-первых, колебания сенсорной ясности. Так, часы, которые держат неподвижно на одном и том же расстоянии от испытуемого, кажутся ему, если он их не видит, то приближающимися, то удаляющимися, в силу того, что он то более, то менее явственно слышит их биение.

Эти и подобные им случаи колебания сенсорной ясности, очевидно, непосред­ственно связаны с утомлением и адаптацией органов чувств. Иной характер носят колебания внимания, сказывающиеся при наблюдении многозначных фигур; в них попеременно то одна, то другая часть выступает как фигура: глаз соскальзывает с одного поля на другое. В этом можно убедиться если посмотреть на рисунок, в котором мы поочередно видим то вазу, то два профиля. Такой же эффект дает изображение усеченной пирамиды, стоит более длительное время на нее посмот­реть, чтобы убедиться в том, что усеченное основание то выступает вперед, то отступает назад.

Однако традиционная трактовка проблемы устойчивости внимания, связан­ная с установлением периодических его колебаний, требует некоторой ревизии.

Положение с этой проблемой аналогично тому, какое создалось в психоло­гии памяти в связи с установленной Эббингаузом и его последователями кри­вой забывания. Учебная работа была бы бесплодным, сизифовым трудом, если бы кривая Эббингауза отражала общие закономерности забывания всякого ма­териала. Учебная и производственная работа была бы вообще невозможна, если бы пределы устойчивости внимания определялись периодами, установленными в опытах с элементарными сенсорными раздражителями. Но в действительно­сти такие малые периоды колебания внимания, очевидно, ни в коем случае не составляют всеобщую закономерность. Об этом свидетельствуют наблюдения на каждом шагу. Очевидно, проблема устойчивости внимания должна быть поставлена и разработана заново. При этом существенно не столько экспери­ментально установить собственно очевидный факт значительно большей устой­чивости внимания, сколько вскрыть конкретные условия, которыми объясняют­ся частые периодические колебания в одних случаях, значительная устойчи­вость — в других.

Наша гипотеза заключается в следующем: наиболее существенным условием устойчивости внимания является возможность раскрывать в том предмете, на котором оно сосредоточено, новые стороны и связи. Там, где в связи с поставлен­ной перед собой задачей мы, сосредоточиваясь на каком-нибудь предмете, можем развернуть данное в восприятии или мышлении содержание, раскрывая в нем новые аспекты в их взаимосвязях и взаимопереходах, внимание может очень дли­тельное время оставаться устойчивым. Там, где сознание упирается как бы в тупик, в разрозненное, скудное содержание, не открыва­ющее возможности для дальнейшего развития, движе­ния, перехода к другим его сторонам, углубления в не­го, там создаются предпосылки для легкой отвлекаемости и неизбежно наступают колебания внимания.

Подтверждение этого положения имеется еще в од­ном наблюдении Гельмгольца. Изучая борьбу двух по­лей зрения (см. рис.), Гельмгольц отметил замечательный факт, в котором заключается ключ для объяснения устойчи­вости внимания, несмотря на периодические колебания сенсорных установок. «Я чувствую, — пишет Гельмгольц, — что могу направлять внимание произволь­но то на одну, то на другую систему линий и что в таком случае некоторое время только одна эта система сознается мною, между тем как другая совершенно ус­кользает от моего внимания. Это бывает, например, в том случае, если я попыта­юсь сосчитать число линий в той или другой системе. Крайне трудно бывает надолго приковать внимание к одной какой-нибудь системе линий, если только мы не связываем предмета нашего внимания с какими-нибудь особенными целями, которые постоянно обновляли бы активность нашего внимания. Так поступаем мы, задаваясь целью сосчитать линии, сравнить их размеры и т. п. Внимание, предо­ставленное самому себе, обнаруживает естественную наклонность переходить от одного нового впечатления к другому; как только его объект теряет свой интерес, не доставляя никаких новых впечатлений, внимание, вопреки нашей воле, перехо­дит на что-нибудь другое. Если мы хотим сосредоточить наше внимание на опре­деленном объекте, то нам необходимо постоянно открывать в нем все новые и новые стороны, в особенности когда какой-нибудь посторонний импульс отвлека­ет нас в сторону» (см. рис. выше, на этой стр.). Эти наблюдения Гельмгольца вскрывают самые существенные условия устойчивости внимания. Наше вни­мание становится менее подверженным колебаниям, более устойчивым, когда мы включаемся в разрешение определенных задач, в интеллектуальных опера­циях раскрываем новое содержание в предмете нашего восприятия или нашей мысли. Сосредоточение внимания — это не остановка мыслей на одной точке, а их движение в едином направлении. Для того чтобы внимание к какому-нибудь предмету поддерживалось, его осознание должно быть динамическим процессом. Предмет должен на наших глазах развиваться, обнаруживать пе­ред нами все новое содержание. Лишь изменяющееся и обновляющееся содер­жание способно поддерживать внимание. Однообразие притупляет внимание, монотонность угашает его.

На вопрос о том, благодаря чему ему удалось прийти к открытию законов тяготения, Ньютон ответил: «Благодаря тому, что я непрестанно думал об этом вопросе». Ссылаясь на эти слова Ньютона, Кювье определяет гений как неустан­ное внимание. Основание гениальности Ньютона он видит в устойчивости его внимания. Но обратная зависимость более существенна. Богатство и содержа­тельность его ума, открывавшего в предмете его мысли все новые стороны и зависимости, было, очевидно, существенным условием устойчивости его внимания. Если бы мысль Ньютона при размышлении о тяготении уперлась в одну непо­движную точку, будучи не в силах развернуть этот вопрос, раскрывая в нем новые перспективы, его внимание быстро иссякло бы.

Но если бы мысль лишь переходила с одного содержания на другое, можно было бы скорее говорить о рассеянности, чем о сосредоточенности внимания. Для наличия устойчивого внимания необходимо, очевидно, чтобы изменяющееся содержание было объединено совокупностью отношений в одно единство. Тогда, переходя от одного содержания к другому, оно остается сосредоточенным на одном предмете. Единство предметной отнесенности соединяется с многообра­зием предметного содержания. Устойчивое внимание — это форма предметно­го сознания. Оно предполагает единство предметной отнесенности многообраз­ного содержания. Таким образом, осмысленная связанность, объединяющая многообразное, динамическое содержание в более или менее стройную систе­му, сосредоточенную вокруг одного центра, отнесенную к одному предмету, составляет основную предпосылку устойчивого внимания.

Если бы внимание при всех условиях было подвержено таким колебаниям, какие имеют место, когда нам даны разрозненные и скудные по содержанию чувственные данные, никакая эффективная умственная работа не была бы воз­можна. Но оказывается, что самое включение умственной деятельности, рас­крывающей в предметах новые стороны и связи, изменяет закономерности этого процесса и создает условия для устойчивости внимания. Устойчивость внима­ния, будучи условием продуктивной умственной деятельности, является в изве­стной мере и ее следствием.

Осмысленное овладение материалом, раскрывающее посредством анализа и синтеза систематизацию материала и т. д., внутренние связи четко расчленен­ного содержания, существенно содействует высшим проявлениям внимания.

Устойчивость внимания зависит, конечно, помимо того, от целого ряда усло­вий. К числу их относятся: особенности материала, степень его трудности, зна-комости, понятности, отношение к нему со стороны субъекта — степени его интереса к данному материалу и, наконец, индивидуальные особенности лич­ности. Среди последних существенна прежде всего способность посредством сознательного волевого усилия длительно поддерживать свое внимание на оп­ределенном уровне, даже если то содержание, на которое оно направлено, не представляет непосредственного интереса, и сохранение его в центре внимания сопряжено с определенными трудностями.

Устойчивость внимания не означает его неподвижности, она не исключает его переключаемости. Переключаемость внимания заключается в способности быстро выключаться из одних установок и включаться в новые, соответствую­щие изменившимся условиям. Способность к переключению означает гибкость внимания — весьма важное и часто очень нужное качество.

Переключаемость, как и устойчивость, и объем внимания, и как внимание в целом, не является какой-то самодовлеющей функцией. Она — сторона слож­ной и многообразно обусловленной сознательной деятельности, в отличие от рассеяния или блуждания ни на чем не концентрированного внимания и от внимания неустойчивого, попросту неспособного длительно удержаться на од­ном объекте. Переключаемость означает сознательное и осмысленное переме­щение внимания с одного объекта на другой. В таком случае очевидно, что переключаемость внимания в сколько-нибудь сложной и быстро изменяющей­ся ситуации означает способность быстро ориентироваться в ситуации и опре­делить или учесть изменяющуюся значимость различных в нее включающихся элементов.

Легкость переключения у разных людей различна: одни — с легкой переключаемостью — легко и быстро переходят от одной работы к другой; у других «вхождение» в новую работу является трудной операцией, требующей более или менее длительного времени и значительных усилий. Легкая или затруднительная переключаемость зависит от целого ряда условий. К числу их относятся соотно­шение между содержанием предшествующей и последующей деятельности и отно­шение субъекта к каждой из них: чем интереснее предшествующая и менее инте­ресна последующая деятельность, тем, очевидно, труднее переключение; и оно тем легче, чем выраженное обратное соотношение между ними. Известную роль в быстроте переключения играют и индивидуальные особенности субъекта, в ча­стности его темперамент. Переключаемость внимания принадлежит к числу свойств, допускающих значительное развитие в результате упражнения. Рассеян­ность в житейском смысле слова является по преимуществу плохой переключаемостью. Имеется бесчисленное множество более или менее достоверных анекдо­тов о рассеянности ученых. Тип рассеянного профессора не сходит со страниц юмористических журналов. Однако, вопреки прочно укоренившемуся в обыва­тельском понимании представлению, «рассеянность» ученых является, наоборот, выражением максимальной собранности и сосредоточенности; но только сосредо­точены они на основном предмете своих мыслей. Поэтому при столкновении с рядом житейских мелочей они могут оказаться в том смешном положении, кото­рое живописуют анекдоты. Для того чтобы уяснить себе наличие сосредоточен­ности у «рассеянного» ученого, достаточно сравнить его внимание с вниманием ребенка, который выпускает из рук только что привлекшую его игрушку, когда ему показывают другую; каждое новое впечатление отвлекает его внимание от предыдущего; удержать в поле своего сознания оба он не в состоянии. Здесь отсутствуют и концентрированность, и распределяемость внимания. В поведении рассеянного ученого также обнаруживается дефект внимания, но он заключается, очевидно, не в легкой отвлекаемости, так как его внимание, наоборот, очень сосре­доточено, а в слабой переключаемости. Рассеянность в обычном смысле слова обусловлена двумя различными механизмами — сильной отвлекаемостью и сла­бой переключаемостью.

Различные свойства внимания — его концентрация, объем и распределяемость, переключаемость и устойчивость — в значительной мере независимы друг от друга: внимание хорошее в одном отношении может быть не столь совершенным в другом. Так, например, высокая концентрация внимания может, как об этом свидетельствует пресловутая рассеянность ученых, соединяться со слабой пере­ключаемостью.

Мы охарактеризовали внимание как проявление избирательной направленно­сти психической деятельности, как выражение избирательного характера процес­сов сознания. Можно было бы к этому прибавить, что внимание выражает не только как бы объем сознания, поскольку в нем проявляется избирательный ха­рактер сознания, но и его уровень — в смысле степени интенсивности, яркости.

Внимание неразрывно связано с сознанием в целом. Оно, поэтому, естественно, связано со всеми сторонами сознания. Действительно, роль эмоциональных фак­торов ярко сказывается в особенно существенной для внимания зависимости его от интереса. Значение мыслительных процессов, особенно в отношении объема внимания, а также его устойчивости, была уже отмечена. Роль волы находит себе непосредственное выражение в факте произвольного внимания.

Внимание: свойства, функции и виды

Внимание— направленность психики на определенные объекты, сосредоточенность на них. Внимание — психофизиологический процесс, состояние, характеризующее динамические особенности познавательной деятельности, которые выражаются в ее сосредоточенности на сравнительно узком участке внешней или внутренней действительности, которые на данный момент времени становятся осознаваемыми и концентрируют на себе психические и физические силы человека в течение определенного периода времени.

Внимание — это процесс сознательного или бессознательного (полусознательного) отбора одной информации, поступающей через органы чувств, и игнорирования другой.

Пять основных свойств внимания:

1. устойчивость,

2. сосредоточенность,

3. переключаемость,

4. распределение,

5. объем.

Устойчивость внимания — способность в течение длительного времени сохранять состояние внимания на каком-либо объекте, предмете деятельности, не отвлекаясь и не ослабляя внимание.

Сосредоточенность внимания (противоположное качество -рассеянность) — проявляется в различиях, в степени концентрированности внимания на одних объектах и его отвлечении от других.

Переключаемость внимания — переводвнимания с одного объекта на другой, с одного вида деятельности на иной. Проявляется в скорости, с которой он может переводить свое внимание с одного объекта на другой, причем такой перевод может быть как непроизвольным, так и произвольным.

Распределение внимания — способность рассредоточить внимание на значительном пространстве, параллельно выполнять несколько видов деятельности или совершать несколько различных действий.

Объем внимания — количество информации, одновременно способной сохраняться в сфере повышенного внимания (сознания) человека.

Численная характеристика среднего объема внимания людей — 5—7 единиц информации.

 

Функции внимания:

  • активизирует нужные и тормозит ненужные в данный момент психологические и физиологические процессы,
  • способствует организованному и целенаправленному отбору поступающей в организм информации в соответствии с его актуальными потребностями,
  • обеспечивает избирательную и длительную сосредоточенность психической активности на одном и том же объекте или виде деятельности.
  • определяет точность и детализацию восприятия,
  • определяет прочность, и избирательность памяти,
  • определяет направленность и продуктивность мыслительной деятельности.
  • является своеобразным усилителем для перцептивных процессов, позволяющим различать детали изображений.
  • выступает для человеческой памяти как фактор, способный удерживать нужную информацию в кратковременной и оперативной памяти, как обязательное условие перевода запоминаемого материала в хранилища долговременной памяти.
  • для мышления выступает как обязательный фактор правильного понимания и решения задачи.
  • в системе межчеловеческих отношений способствует лучшему взаимопониманию, адаптации людей друг к другу, предупреждению и своевременному разрешению межличностных конфликтов.
  • о внимательном человеке говорят как о приятном собеседнике, тактичном и деликатном партнере по общению.
  • внимательный человек лучше и успешнее обучается, большего достигает в жизни, чем недостаточно внимательный.

 

Основные виды внимания:

  • природное и социально обусловленное внимание,
  • непосредственное и опосредствованное внимание,
  • непроизвольное и произвольное внимание,
  • чувственное и интеллектуальное внимание.

Природное внимание — дано человеку с самого его рождения в виде врожденной способности избирательно реагировать на те или иные внешние или внутренние стимулы, несущие в себе элементы информационной новизны (ориентировочный рефлекс).

Социально обусловленное внимание — складывается прижизненно в результате обучения и воспитания, связано с волевой регуляцией поведения, с избирательным сознательным реагированием на объекты.

Непосредственное внимание — не управляется ничем, кроме того объекта, на который оно направлено и который соответствует актуальным интересам и потребностям человека.

Опосредствованное внимание — регулируется с помощью специальных средств, например жестов, слов, указательных знаков, предметов.

Непроизвольное внимание — не связано с участием воли, не требует усилий для того, чтобы удерживать и в течение определенного времени сосредоточивать на чем-то внимание.

Произвольное внимание — обязательно включает волевую регуляцию, требует усилий для того, чтобы удерживать и в течение определенного времени сосредоточивать на чем-то внимание, обычно связано с борьбой мотивов или побуждений, наличием сильных, противоположно направленных и конкурирующих друг с другом интересов,

Чувственное внимание — связано с эмоциями и избирательной работой органов чувств, в центре сознания находится какое-либо чувственное впечатление.

Интеллектуальное внимание — преимущественно связано с сосредоточенностью и направленностью мысли, объектом интереса является мысль.

Формы расстройств внимания:

1. Повышенная отвлекаемость – чрезмерная подвижность внимания, постоянный переход от одного объекта и вида деятельности к другому;

2. Уменьшение объема внимания;

3. Инертность (малая подвижность) внимания – невозможность своевременной быстрой переключаемости или патологическая фиксация внимания;

4. Гипо- и апрозекксияневозможность в течение необходимого периода времени сосредоточить на чем-нибудь внимание и полное выпадение внимания.

Рандомизированное исследование для оценки биоэквивалентности между NEURONTIN® и GABASANDOZ® на уровне отдельных субъектов — исследовательский портал Университета Гронингена {\textregistered} и GABASANDOZ{\textregistered} на уровне отдельных субъектов»,

abstract = «Неврологи обычно не рекомендуют генерическую замену противоэпилептических препаратов.В настоящем исследовании изучалась возможность замены таблеток габапентина 800 мг (NEURONTIN{\textregistered} и GABASANDOZ{\textregistered}) с использованием индивидуального дизайна исследования биоэквивалентности (IBE) с 2 партиями каждого продукта, и оценивалась вариабельность между партиями и между составами. при воздействии играют существенную роль во внутрисубъектной изменчивости. Испытание было проанализировано в соответствии со структурой Управления по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов для установления IBE. IBE был показан между обоими продуктами с 95% верхней доверительной границей (UCB) критерия IBE, равной -2.01 и -2,31 для AUC0-inf и Cmax соответственно. Вариабельность от субъекта к препарату (1,35%) была незначительной по сравнению с вариабельностью AUC0-inf внутри субъекта с NEURONTIN {\ textregistered} (19,0%) и GABASANDOZ {\ textregistered} (23,6%). Включение дополнительной партии существенно не изменило эту внутрисубъектную изменчивость (20,2% и 23,6% соответственно). Это исследование показывает, что замена таблеток габапентина 800 мг на NEURONTIN{\textregistered} и GABASANDOZ{\textregistered} должна быть возможной, не влияя на клинические результаты.Эта статья защищена авторским правом. Все права защищены.»,

автор = «{Ван Ланкер}, Грит и {Ван Бортель}, Люк и Брант Делафонтен и Коэн Буссери и Элеонора Сварт и Абдель Шахбуни и {Ван Бокслаер}, Ян и Питер Колин»,

note = «Эта статья защищена авторским правом. Все права защищены.»,

год = «2019»,

месяц = ​​июль,

doi = «10.1002/cpt.1353»,

язык = «английский»,

объем = «106»,

страницы = «195—203»,

журнал = «Клиническая фармакология и терапия»,

issn = «0009-9236»,

издатель = «Nature Publishing Group»,

номер = «1»,

}

Preventice добавляет возможность переключения «три в одном» в систему удаленного мониторинга BodyGuardian

10 октября 2014 г. — Preventice Inc.объявила об улучшениях в своей системе удаленного мониторинга BodyGuardian, которые потенциально могут упростить удаленный мониторинг для пациентов и способствовать более эффективному процессу оказания помощи при переходе между потребностями мониторинга для отдельных пациентов. В то же время улучшенный BodyGuardian может упростить административные операции по выставлению счетов и обслуживанию для поставщиков медицинских услуг. Усовершенствования продукта BodyGuardian делают эти усовершенствования возможными за счет объединения трех основных технологий мониторинга — мобильной телеметрии сердца, мониторинга событий и холтеровского мониторирования — в одном простом в использовании устройстве.

«В течение многих лет наблюдение за пациентами на разных стадиях сердечного заболевания требовало использования нескольких устройств для мониторинга, которые могут создавать путаницу и беспокойство для пациента, не говоря уже о длительном опыте наблюдения, дополнительном обучении врачей и пациентов и сложности выставления счетов. », — сказал Брайан Класман, вице-президент по маркетингу Preventice. «BodyGuardian решает эти проблемы, объединяя три наиболее распространенных типа технологий мониторинга в одном устройстве.

Кардиологические пациенты обычно контролируются одним из трех способов, и часто поставщикам медицинских услуг необходимо переключаться между следующими устройствами мониторинга, чтобы получить четкий и правильный диагноз: 1) мобильная сердечная телеметрия, которая собирает более широкую базу физиологических данных в в режиме реального времени в течение более длительного периода времени; 2) мониторинг событий, при котором ритмы отслеживаются в сочетании с конкретным сердечным событием, таким как брадикардия, и 3) холтеровское мониторирование, при котором сердечные ритмы отслеживаются почти в реальном времени в течение коротких периодов времени.Теперь BodyGuardian позволяет врачам переключаться между этими режимами мониторинга для диагностики различных потребностей пациентов с помощью одного простого в использовании устройства.

«Диагностика сердечного заболевания может занять время и может потребовать нескольких диагностических подходов», — сказал Питер Брэди, медицинский директор Лаборатории электрокардиографии, сердечного ритма и физиологического мониторинга в клинике Майо. «Переход между различными режимами мониторинга обычно увеличивает время и сложность этого процесса как для пациентов, так и для поставщиков медицинских услуг.Использование одного устройства с переключаемостью «три в одном» может смягчить эту проблему, позволяя медицинским учреждениям предоставлять более плавный и эффективный уход за пациентами».

BodyGuardian потенциально может привести к более быстрой диагностике и, в конечном счете, лечению, чем традиционные устройства, поскольку поставщикам медицинских услуг не нужно физически обмениваться устройствами со своим центром мониторинга, что может задержать доставку отчетов о состоянии пациента до тех пор, пока устройство не будет возвращается и отчеты загружаются.Вместо этого BodyGuardian позволяет провайдеру переключаться между подходами к мониторингу одним щелчком виртуального переключателя.

«Обеспечение непрерывности лечения и безопасного и непрерывного обслуживания пациентов имеет первостепенное значение для поставщиков медицинских услуг сегодня», — сказал Джон Оттерштаттер, президент и основатель Preventice. «Поскольку реформа здравоохранения требует большего внимания к качественным результатам и снижению затрат, поставщики медицинских услуг обратятся к таким технологиям, как удаленный мониторинг, чтобы диагностировать и лечить больше пациентов таким образом, чтобы эффективно и результативно использовать время, деньги и кадровые ресурсы.

Разработанный в сотрудничестве с клиникой Мэйо, BodyGuardian использует сложные алгоритмы для поддержки удаленного мониторинга людей с сердечными аритмиями. BodyGuardian одобрен для обнаружения и мониторинга несмертельных сердечных аритмий у амбулаторных пациентов.

Для получения дополнительной информации: www.preventice.com

Реверсивно переключаемая флуоресцентная микроскопия с повышенным разрешением и контрастностью изображения

1.

Введение

Субдифракционная визуализация открыла новые возможности для фундаментальных биологических исследований. 1 Благодаря разрешению выше предела оптической дифракции субдифракционная визуализация позволяет наблюдать клеточные и субклеточные структуры и процессы, которые невозможно разрешить с помощью обычных микроскопов. Как правило, методы субдифракции делятся на две широкие категории: методы ансамблевой визуализации с направленным освещением, такие как микроскопия истощения стимулированного излучения, 2 оптическая микроскопия с динамическим насыщением, 3 , 4 визуализация обратимых насыщаемых оптических флуоресцентных переходов (RESOLFT). , 5 и микроскопия со структурированным освещением; 6 и методы визуализации и локализации отдельных молекул, такие как (флуоресцентная) фотоактивационная локализационная микроскопия [(F)PALM] 7 , 8 и стохастическая оптическая реконструкционная микроскопия (STORM). 9

Недавно мы разработали новый метод субдифракционной визуализации путем интеграции эффекта фотообесцвечивания, зависящего от интенсивности, в фотоакустическую микроскопию на основе поглощения. 10 Латеральное разрешение 80 нм было продемонстрировано с помощью фотообесцвечивания наночастиц золота. Осевое разрешение также улучшается за счет эффективного устранения вклада сигнала вне фокуса. Было выполнено оптическое секционирование крупных целей, которое иначе отсутствует в фотоакустической микроскопии с широким полем обнаружения.Что еще более важно, этот метод является универсальным и может применяться как к флуоресцентным, так и к нефлуоресцентным мишеням. После первой демонстрации в фотоакустической визуализации этот метод был принят в флуоресцентной визуализации, включая конфокальную микроскопию, двухфотонную микроскопию, широкопольную микроскопию и микроскопию светового листа. 11 13 Однако фотообесцвечивание является необратимым процессом и неизбежно нарушит первоначальный контраст. Таким образом, субдифракционная визуализация на основе фотообесцвечивания не подходит для биологических исследований, где постоянные изменения недопустимы.

Вместо постоянного фотообесцвечивания обратимо переключаемые флуорофоры, включая обратимо переключаемые флуоресцентные белки (rsFP) и синтетические красители, могут переключаться между флуоресцентным (ВКЛ) и нефлуоресцентным (ВЫКЛ) состояниями при освещении на соответствующих длинах волн. 14 , 15 15 В последние годы RSFPS, такие как Green Dronpa, 16 обратимо переключаемый улучшенный зеленый флуоресцентный белок, 17 и RSTAGRFP, 18 , 19 были применены к флуоресценции визуализация с повышенным пространственным разрешением в (F)PALM/STORM, 20 22 RESOLFT, 5 и фотохромная визуализация стохастических оптических флуктуаций (pcSOFI). 23 Они также использовались для усиления слабых сигналов в оптической синхронной визуализации обнаружения (OLID). 24 Совсем недавно на тканевых фантомах, помеченных rsFP, были продемонстрированы два аналогичных метода, такие как визуализация многофотонной деактивации (MPDI) и визуализация многофотонной активации (MPAI), 25 . MPDI и MPAI значительно улучшили контраст изображения, воспользовавшись разницей в скорости переключения rsFP в оптическом фокусе и вне его. Однако многие из существующих методов субдифракционной визуализации, основанные на rsFP, полагаются исключительно на два крайних состояния ВКЛ и ВЫКЛ, в то время как процесс переключения, который занимает большую часть времени визуализации, не используется.Кроме того, некоторые из методов субдифракционной визуализации должны надежно циклировать rsFP сотни раз, что ограничивает выбор пригодных для использования флуорофоров. 5

Здесь мы предлагаем простой метод субдифракционной визуализации без потерь, расширяющий предыдущие методы, основанные на фотообесцвечивании, с помощью rsFP. Мы назвали этот метод «обратимо переключаемой микроскопией фотоотпечатка (rsPIM)». В отличие от других методов, основанных на rsFP, в rsPIM повышение разрешения достигается за счет тщательного изучения процесса переключения между двумя крайними состояниями.Мы продемонстрировали, что скорость переключения rsFP между состояниями ON и OFF сильно зависит от интенсивности освещения, что позволяет пространственно обрезать объем возбуждения до субдифракционного размера. Кроме того, наши результаты показали, что оптическое сечение можно улучшить, используя зависимость скорости переключения от осевого положения. Основным преимуществом нашего метода является техническая простота, при которой используется коммерческая «готовая» система визуализации без каких-либо инженерных модификаций.Поскольку не требуется сложной схемы освещения или повторного переключения rsFP, это устранило строгие требования точного оптического выравнивания и устойчивости флуорофоров к фотообесцвечиванию.

2.

Принцип реверсивно переключаемого фотоотпечатка для микроскопии

Принцип rsPIM показан на рис. 1(a). rsPIM реализован на коммерческом конфокальном микроскопе (Olympus FV1000). Когда флуорофоры во включенном состоянии возбуждаются гауссовым пучком на длине волны выключения, генерируемый сигнал флуоресценции представляет собой сумму вкладов всех флуорофоров в объеме возбуждения [рис.1(а)]. Во время возбуждения флуорофоры внутри объема возбуждения выключаются со скоростью, зависящей от пространственного распределения локальной интенсивности возбуждения [рис. 1(а)]. Скорость выключения обычно имеет зависимость от мощности один от интенсивности возбуждения при однофотонном поглощении и не менее двух при двухфотонном поглощении. 13 Следовательно, сигнал флуоресценции в центре объема возбуждения затухает быстрее, чем на периферии. В результате затухание сигнала флуоресценции не только отражает профиль интенсивности возбуждения, но и включает в себя распределение выключения флуорофора (рис.1(а)], которая нелинейно зависит от интенсивности локального возбуждения. Подгонка результирующего затухания флуоресцентного сигнала показывает, что флуорофоры в центре вносят больший вклад в коэффициенты высокого порядка полиномиальной подгонки, чем флуорофоры на периферии. Следовательно, извлечение коэффициентов высокого порядка может повысить резкость соответствующего объема возбуждения во всех измерениях.

Рис. 1

Характеристика микроскопии с обратимо переключаемым фотоотпечатком (rsPIM). (а) Принцип визуализации rsPIM.В пределах дифракционно-ограниченного пятна возбуждения флуорофоры в состоянии «включено» переключаются в состояние «выключено», где скорость выключения (koff) увеличивается линейно с локальной интенсивностью возбуждения. Такая зависимость интенсивности приводит к неоднородному уменьшению сигнала флуоресценции по объему возбуждения, при этом центр затухает быстрее, чем периферия. Подбирая динамику выключения, rsPIM может повысить эффективность объема возбуждения и, таким образом, улучшить разрешение изображения.Весь процесс можно повторить, переключая флуорофоры между состояниями ON и OFF. (б) Иллюстрация улучшения бокового разрешения с помощью rsPIM. В первом приближении эффективная функция рассеяния точки (ФРТ) является произведением ФРТ возбуждения и профиля выключения. (c) Иллюстрация повышения осевого разрешения, предоставленная rsPIM. Зависимость скорости выключения от осевого положения в значительной степени устраняет внефокусные вклады. (d) Схема конфокальной микроскопии.(e) Динамика интенсивности флуоресцентного сигнала Alexa Fluor 647 (AF647) во времени в течение трех последовательных циклов переключения. Флуоресценцию нормализовали к начальной точке первого цикла. (f) Динамика выключения во времени с тремя репрезентативными значениями интенсивности возбуждения, измеренными на задней апертуре объектива. (ж) Линейная зависимость скорости выключения от интенсивности возбуждающего света.

Для бокового разрешения схема этой концепции представлена ​​на рис.1(б). Эффективная функция бокового рассеяния точки (PSF) [Рис. 1(б), правая панель] системы острее, чем ФРТ начального латерального возбуждения [рис. 1(б), левая панель] в 2+bk раз, где b — степенная зависимость скорости выключения от интенсивности возбуждения, k — порядок полиномиальной аппроксимации затухания сигнала. 10 Для сравнения, латеральная PSF конфокальной микроскопии острее, чем PSF начального возбуждения, в 2 раза. Подробные математические расчеты для увеличения разрешения в rsPIM можно найти в Refs.10 и 13

Помимо улучшения бокового разрешения, нелинейный характер сигнала rsPIM улучшает оптическое сечение в осевом направлении, что представляет особый интерес для больших (или плоских) целей. Простая иллюстрация показана на рис. 1(c). По сравнению с флуорофорами, находящимися в фокусе, флуорофоры вне фокуса менее подвержены влиянию процесса выключения. Следовательно, коэффициенты высокого порядка, извлеченные из полиномиальной аппроксимации затухания сигнала, будут содержать небольшое количество вкладов вне фокуса и, таким образом, сделают оптическую фокальную зону более резкой.Подобно усилению латерального разрешения, сила секционирования rsPIM определяется степенной зависимостью скорости выключения от интенсивности возбуждения. Для точечных целей rsPIM может улучшить осевое разрешение в 1/21/(2+bk)-1 раз по сравнению с обычной микроскопией. Для больших целей rsPIM может улучшить аксиальное разрешение в 1/21/(1+bk)-1 раз по сравнению с конфокальной микроскопией. 10

3.

Экспериментальные методы

Чтобы продемонстрировать вышеуказанный принцип, визуализацию rsPIM проводили на фиксированных клетках, окрашенных обратимо переключаемым синтетическим красителем, и на живых клетках, экспрессирующих генетически кодируемый красный флуоресцентный белок.Флуоресцентный краситель Alexa Fluor 647 (AF647) был впервые использован для демонстрации нашего метода на фиксированных клетках. AF647 представляет собой синтетический зонд на основе карбоцианина, который можно обратимо включать и выключать при 405 и 635 нм соответственно. 22 В дополнение к демонстрации rsPIM с красителями, мы также использовали этот метод с генетически кодируемым rsTagRFP на живых клетках. rsTagRFP можно включать и выключать при длине волны 440 и 570 нм соответственно. 26

3.1.

Флуоресцентная визуализация

После того, как образец был помечен AF647, флуоресцентные изображения были получены на микроскопе Olympus Fluoview FV1000 (Olympus America Inc., Center Valley, Pennsylvania) 27 с масляным иммерсионным объективом (PlanApo, 100×, числовая апертура = 1,4, Nikon Instruments Inc., Мелвилл, Нью-Йорк) [Рис. 1(г)]. Для конфокальной визуализации использовался лазер непрерывного действия с длиной волны 635 нм для возбуждения и переключения красителя в выключенное состояние. Флуоресцентный свет выбирался с помощью барьерного фильтра от 655 до 755 нм. Лазер непрерывного действия с длиной волны 405 нм активировал краситель в активное состояние. Время экспозиции для каждого пикселя составляло 4  мкс, а размер шага сканирования — 0,07  мкм.

Для конфокальной визуализации rsTagRFP синий лазер с длиной волны 460 нм использовался для переключения белков в состояние ВКЛ, а зеленый лазер с длиной волны 530 нм использовался для переключения белков в состояние ВЫКЛ. Барьерный фильтр от 570 до 625 нм отбирал флуоресцентный свет во время процесса выключения. Время экспозиции для каждого пикселя составляло 8  мкс, а размер шага сканирования — 0,09  мкм. Другие параметры визуализации были такими же, как и при визуализации AF647.

Для широкоугольной визуализации бактериальных клеток rsTagRFP образцы возбуждались ртутной лампой и визуализировались с помощью одного и того же масляного иммерсионного объектива.Флуоресцентные изображения получали с помощью камеры устройства с зарядовой связью 512×512   пикселей (DV412-BV, Andor Technology, Соединенное Королевство). Фильтры возбуждения и излучения были такими же, как те, которые использовались при конфокальной визуализации rsTagRFP.

3.2.

Обработка данных для микроскопии фотоотпечатков с обратимым переключением

Вкратце, сначала к изображению был применен простой порог, чтобы значительно сократить время обработки. Дальнейшей обработке подвергались только пиксели со снижением сигнала более чем на 1% при выключении.В каждом подходящем пикселе затухание сигнала аппроксимировалось полиномиальной функцией от 3 градусов с не более чем 1000 итераций. Извлеченные коэффициенты третьего порядка сформировали изображение rsPIM, а неподходящие пиксели были установлены равными нулю. Все конфокальные изображения, полученные во время цикла переключения, усреднялись и использовались для сравнения.

В OLID-визуализации в качестве эталонного сигнала использовалась усредненная интенсивность сигнала в области клетки в течение трех циклов переключения. Каждый пиксель коррелировался с эталонным сигналом, и коэффициенты корреляции формировали OLID-изображение.

Все данные обработаны с помощью MATLAB® R2010b. В частности, полиномиальная аппроксимация затухания сигнала в rsPIM была выполнена с использованием набора инструментов обработки сигналов. Параллельное вычисление было выполнено, поскольку каждый пиксель был полностью независимым. При использовании восьмиядерной компьютерной станции на частоте 3,4 ГГц общее время обработки составило менее 10 с.

3.3.

Окрашивание клеток Alexa Fluor 647

Предметные стекла с фибробластными клетками NIH 3T3, прилипшими к поверхности стекла, промывали фосфатно-солевым буфером (PBS).Предметные стекла фиксировали в 4% формальдегиде в течение 20 мин и снова промывали PBS. Клетки пермеабилизировали в течение 2 минут в буфере, состоящем из 0,5% (об./об.) Triton X-100, 3% (вес./об.) бычьего сывороточного альбумина (БСА) в PBS. Затем выполняли блокирование с использованием блокирующего буфера [0,2% (об./об.) Triton X-100, 3% (вес./об.) BSA в PBS] в течение 1 ч для снижения неспецифического связывания антител (Abs). Образцы сначала инкубировали с 2  мкг/мл первичных мышиных моноклональных антител к α-тубулину в течение 45 минут и промывали блокирующим буфером.Затем к образцу добавляли 2,5  мкг/мл вторичных козьих антимышиных антител AF647 на 45 минут и промывали блокирующим буфером. Затем сигнал усиливали с использованием 2,5 мкг/мл третичного кроличьего антикозьего антитела AF647. После окрашивания образцы снова фиксировали. К фиксированным предметным стеклам добавляли буфер для визуализации [10% (масс./об.) глюкозы, 0,5 мг/мл глюкозооксидазы, 40  мкг/мл каталазы, 0,7  мг/мл цистеамина в трис-HCl, pH 8,5].

3.4.

Плазмиды и экспрессирующие бактерии

Если не указано иное, все клетки и расходные материалы для молекулярной биологии были приобретены у Life Technologies (Карлсбад, Калифорния).Ген rsTagRFP клонировали в вектор pBAD/His-B в виде фрагмента BglII EcoRI и экспрессировали в бактериальном хозяине LMG194. Обе плазмиды prsTagRFP-h3B и prsTagRFP-β-актин для экспрессии у млекопитающих были сконструированы путем замены гена rsTagRFP на ген mTagBFP2 в соответствующих плазмидах mTagBFP2. 28

3.5.

Культура клеток млекопитающих

Клетки фибробластов NIH 3T3 культивировали в модифицированной среде Игла Дульбекко (DMEM) с добавлением 10% эмбриональной бычьей сыворотки (FBS), 2 мМ глутамина, 100  единиц/мл пенициллина и 100  мкг/мл стрептомицина.Клетки инкубировали при 37°C в 5% CO2 и делили каждые 72 часа.

Эпителиальные клетки HeLa выращивали до 60–80% слияния в среде DMEM/F12 с добавлением 10% FBS и 50  мкг/мл гентамицина. Клетки временно трансфицировали 1   мкг/мл плазмид, кодирующих как слитые конструкции prsTagRFP-h3B, так и prsTagRFP-β-актина, с использованием липофектамина 2000 в соответствии с инструкциями производителя. Клетки высевали на чашки со стеклянным дном (MatTek Corporation, Ashland, Massachusetts) через 24 часа после трансфекции и визуализировали через 48 часов после трансфекции в PBS, снабженном 1% BSA.

4.

Результаты

4.1.

Микроскопия с обратимо переключаемым фотоотпечатком с обратимо переключаемым синтетическим красителем

Сначала мы исследовали динамику переключения AF647. Стеклянная микропробирка, заполненная AF647, неоднократно подвергалась визуализации и циклированию с различной интенсивностью света. Интенсивность флуоресценции снижалась при возбуждении на 635 нм (т. е. при выключении) и надежно восстанавливалась после возбуждения на 405 нм (т. е. при включении) [Фиг.1(д)]. Скорость затухания интенсивности флуоресценции увеличивалась линейно пропорционально интенсивности возбуждения при 635 нм, что свидетельствует об однофотонном процессе поглощения [Фиг. 1(е) и 1(ж)]. Эти фантомные результаты заложили основу для субдифракционной визуализации с помощью rsPIM.

Острая кромка, покрытая AF647, использовалась для количественной оценки латерального разрешения rsPIM. В каждом пикселе затухание сигнала соответствовало полиномиальной функции от 3 град. Здесь оптимальный порядок полинома во многом определялся доступным отношением сигнал/шум (SNR).Извлеченные коэффициенты третьего порядка сформировали изображение rsPIM, а усредненная интенсивность сигнала сформировала изображение конфокальной микроскопии. Для обоих изображений функция рассеяния линий (LSF) была извлечена из измеренной функции рассеяния краев [Рис. 2(а)]. Полная ширина на полувысоте (FWHM) LSF предполагает боковое разрешение 230 нм для конфокальной микроскопии и 130 нм для rsPIM, улучшение в 1,7 раза. Такое улучшение было близко к теоретическому значению 1,6 при b=1 и k=3. Чтобы продемонстрировать эффективность визуализации, были применены конфокальная микроскопия и rsPIM для визуализации монослоя диаметром 500 нм, плотно упакованных микрошариков, окрашенных AF647 [рис.2(б)]. Изображения показывают, что микрогранулы были лучше разрешены с помощью rsPIM, что подтвердило улучшение бокового разрешения. Помимо аппроксимации затухания сигнала полиномиальной функцией, другие методы обработки изображения также могут использоваться для извлечения вклада сигнала из центральной области пятна возбуждения. Например, мы можем аппроксимировать кривую затухания сигнала набором экспоненциальных функций с различными постоянными времени, где наименьшие постоянные времени соответствуют вкладам сигнала из центральной области. 28

Рис. 2

Повышение латерального разрешения с помощью микроскопии с обратимо переключаемым фотоотпечатком (rsPIM). (а) Функция рассеяния линии (LSF) была извлечена из измеренной функции рассеяния краев острой кромки, покрытой Alexa Fluor 647 (AF647). Точки: LSF извлекается для каждого пикселя; Сплошные линии: аппроксимация по Гауссу. Полная ширина на полувысоте (FWHM) LSF предполагает боковое разрешение 230 нм для конфокальной микроскопии и 130 нм для rsPIM, что является улучшением в 1,7 раза.(b) Конфокальная микроскопия (слева) и rsPIM микрогранул размером 500 нм, окрашенных AF647, где отдельные гранулы могут быть лучше разрешены с помощью rsPIM. (c) Конфокальная микроскопия и rsPIM фиксированных фибробластных клеток NIH 3T3, окрашенных антителами, меченными AF647, против α-тубулина. Изображение rsPIM показывает лучшее разрешение и контраст между цитоплазмой и ядром, чем изображение конфокальной микроскопии. Правая колонка: крупные планы заштрихованных областей в левой колонке. (d) Визуализация обнаружения оптической блокировки (OLID) была выполнена на том же образце с тремя циклами переключения.В то время как контраст изображения слабых сигналов был значительно улучшен (стрелки), OLID был менее чувствителен к тонкой разнице в скорости переключения между цитоплазмой и ядром клетки. (e) Профили сигнала вдоль пунктирных линий на (c–d), демонстрирующие улучшение латерального разрешения и контраста цитоплазмы и ядра с помощью rsPIM.

Повышение латерального разрешения rsPIM было дополнительно продемонстрировано на фиксированных фибробластных клетках NIH 3T3, окрашенных меченными AF647 антителами против α-тубулина [фиг. 2(с)]. И конфокальные, и rsPIM-изображения выполнялись с одним циклом переключения.По сравнению с изображением, полученным с помощью конфокальной микроскопии, изображение rsPIM демонстрирует более высокое разрешение субклеточных элементов. Более того, благодаря улучшенному оптическому срезу контраст изображения между цитоплазмой и клеточным ядром улучшился в 22 раза, с 3,8 при конфокальной микроскопии до 83,3 при rsPIM [рис. 2(е)].

Для сравнения также было выполнено OLID-изображение с тремя циклами переключения [Рис. 2(г)]. По сравнению с изображением rsPIM изображение OLID показывает значительно улучшенную видимость слабых сигналов.Однако визуализирующий контраст между цитоплазмой и клеточным ядром ухудшился. Поскольку OLID вычисляет коэффициент корреляции каждого пикселя изображения с заданным опорным сигналом, он выборочно усиливает пиксели, которые напоминают циклический шаблон опорного сигнала. Здесь важно отметить, что OLID очень эффективен для различения переключающихся пикселей от непереключаемых фоновых пикселей, и простой процесс визуализации OLID, выполняемый здесь, может быть не оптимизирован для соответствия современному методу OLID из-за нашего отсутствие экспертизы. 29 Однако мы хотим подчеркнуть, что OLID не так чувствителен к скорости переключения сигнала, как rsPIM [Рис. 2(е)]. 24 Таким образом, OLID не поддерживает субдифракционную визуализацию.

4.2.

Микроскопия с обратимо переключаемым фотоотпечатком с использованием обратимо переключаемого флуоресцентного белка в живых клетках

Здесь мы продемонстрировали повышение разрешения rsPIM в живых клетках с помощью rsTagRFP. Чтобы изучить динамику переключения rsTagRFP, полоски бактериальных клеток LMG194, экспрессирующих rsTagRFP, визуализировали с помощью обычной широкопольной флуоресцентной микроскопии [фиг.3(а)]. Было выполнено три цикла переключений, каждый цикл длился 300 с (включение 150 с, выключение 150 с). После выключения около 90% молекул rsTagRFP переключались обратно во включенное состояние, что подтверждает высокую фотостабильность rsTagRFP (рис. 3(б)]. Скорость выключения rsTagRFP линейно зависит от интенсивности возбуждения. 15 В качестве примера на рис. 3(a) были намеренно выбраны три репрезентативные области, где область B считалась расположенной в фокальной плоскости, а области A и C находились в плоскостях вне фокуса, на основании признака размытие трех областей.Как показано на рис. 3(c), скорости выключения областей A, B и C составляют 0,03  с–1, 0,007  с–1 и 0,015  с–1 соответственно, что отражает неоднородность интенсивности возбуждения вдоль осевой ось луча.

Рис. 3

Микроскопия с обратимым фотоотпечатком (rsPIM) живых бактериальных клеток, экспрессирующих rsTagRFP. ( а ) Традиционное микроскопическое изображение полос бактериальных клеток LMG194, экспрессирующих rsTagRFP, демонстрирующее способность rsTagRFP к переключению. (б) Динамика усредненной динамики переключения rsTagRFP во времени для трех циклов.(c) Время отключения rsTagRFP в трех репрезентативных регионах, где регион B находится в центре внимания, а регионы A и C не в фокусе. Ясно, что область B имеет более высокую скорость переключения, чем области A и C. (d) Сравнение обычной микроскопии и rsPIM при оптических срезах. Используя преимущество неоднородного осевого распределения интенсивности возбуждения, rsPIM может эффективно блокировать сигналы вне фокуса.

Используя преимущество этой аксиальной зависимости скорости выключения, rsPIM может эффективно блокировать влияние сигналов от плоскостей вне фокуса.Сопоставляя затухание сигнала с полиномиальными функциями, можно извлечь коэффициенты третьего порядка, которые представляют компоненты сигнала с более высокими скоростями затухания и, следовательно, с глубин ближе к фокальной плоскости. Как показано на рис. 3(d), по сравнению с обычным изображением, полученным при микроскопии, изображение rsPIM показывает значительно уменьшенные сигналы вне фокуса.

Для дальнейшего изучения эффективности rsPIM при визуализации живых клеток клетки HeLa млекопитающих временно трансфицировали плазмидами, кодирующими слитые белки rsTagRFP.Гистон h3B в ядре клетки и β-актин в цитоплазме, слитый с rsTagRFP, визуализировали как с помощью конфокальной микроскопии, так и с помощью rsPIM. Как и ранее, выполняли три цикла переключения, и экспрессируемый rsTagRFP в живых клетках мог стабильно включаться и выключаться. Динамика переключения была извлечена в rsPIM. По сравнению с конфокальной микроскопией улучшенное разрешение rsPIM продемонстрировано как rsTagRFP-h3B [фиг. 4(a) и 4(b)] и rsTagRFP-β-актин [фиг. 4(c) и 4(d)]. В частности, на изображении rsPIM можно различить три соседних β-актиновых волокна, но не на конфокальном изображении [рис.4(г)]. Средний измеренный диаметр волокна β-актина составляет около 500 нм, что согласуется с литературными данными. 30 По сравнению с конфокальной микроскопией сигналы автофлуоресценции от фона лучше подавлялись в rsPIM, потому что их нельзя было отключить как rsTagRFP.

Рис. 4

Микроскопия с обратимым фотоотпечатком (rsPIM) живых клеток млекопитающих, экспрессирующих rsTagRFP. ( а ) Сравнение конфокальной микроскопии и rsPIM эпителиальных клеток HeLa, временно трансфицированных слиянием rsTagRFP-h3B.На изображениях крупным планом показаны увеличенные изображения областей, отмеченных пунктирными прямоугольниками. rsPIM может обеспечить более четкие характеристики, чем конфокальная микроскопия. (б) Профили сигнала вдоль пунктирных линий на изображениях крупным планом в (а). (c) Конфокальная микроскопия и rsPIM клеток HeLa, экспрессирующих гибрид rsTagRFP-β-актин. Изображения rsPIM демонстрируют превосходное разрешение (изображения крупным планом) и эффективное устранение фоновых сигналов автофлуоресценции (стрелки). (d) Профили сигнала вдоль пунктирных линий на изображениях крупным планом на (c), где три соседних волокна β-актина можно четко различить с помощью rsPIM, но не с помощью конфокальной микроскопии.Пунктирные линии представляют собой гауссовую аппроксимацию профилей сигнала, показывающую средний диаметр волокна ~500  нм.

5.

Обсуждение

RsPIM представляет собой метод субдифракционной визуализации синтетических или генетически закодированных оптических переключателей и сочетает в себе простоту применения с обычной конфокальной микроскопией. Этот подход основан на специфических свойствах оптических переключателей: их флуоресцентное излучение может включаться и выключаться, а скорость переключения зависит от интенсивности возбуждения.Эти свойства сразу дают четыре преимущества: (1) фоновые сигналы автофлуоресценции, которые обычно не обладают такими способностями к переключению и поэтому могут быть легко удалены, что приводит к улучшению контраста между клетками и фоном, (2) флуорофоры в центральной области объем возбуждения выключается быстрее, чем на периферии из-за гауссовского распределения интенсивности света. Нелинейная зависимость сигнала от интенсивности возбуждения может быть извлечена из динамики переключения, обеспечивая улучшенное латеральное разрешение, (3) аналогично из-за неравномерного осевого распределения интенсивности света флуорофоры в фокальной плоскости выключаются быстрее, чем те, что вне поля зрения. фокус.Нелинейная подгонка динамики переключения может блокировать большее количество расфокусированных сигналов и, таким образом, улучшать оптическое сечение, и (4) выключенные флуорофоры могут включаться в конце каждого цикла, что приводит к получению изображений без потерь. Таким образом, изображения можно получать много раз для лонгитюдных исследований.

Используя эти преимущества, rsPIM добился субдифракционной визуализации обратимо переключаемых красителей и флуоресцентных белков. Этот метод не требует системных модификаций существующих коммерческих флуоресцентных микроскопов и, таким образом, потенциально может быть адаптирован обычными клеточными биологическими лабораториями.Принцип rsPIM может быть перенесен на двухфотонную микроскопию и основной инструмент оптической визуализации для нейрофизиологических исследований. Скорость переключения зависит от мощности как минимум на два при двухфотонном поглощении, и двухфотонный rsPIM должен иметь более выраженное улучшение разрешения по сравнению с однофотонным rsPIM. Поскольку фотопереключение происходит на этапе возбуждения процесса визуализации, наш метод потенциально может быть применен к фотоакустической микроскопии, где лазерно-индуцированные акустические волны обнаруживаются с помощью сфокусированного ультразвукового преобразователя. 31 , 32 Поскольку повышение разрешения за счет динамики фотопереключения дополняет другие механизмы субдифракции, принцип rsPIM может быть включен в другие методы для дальнейшего улучшения их разрешения. 2 , 6 , 33 Практически все реверсивно переключаемые флуорофоры можно использовать для rsPIM. В частности, предпочтительны переключаемые флуорофоры с высокой устойчивостью к фотообесцвечиванию и коротким временем переключения.Поскольку rsPIM в основном требует повторного сканирования и простой математической подгонки, в исходное программное обеспечение стандартных микроскопов можно включить дополнительную функцию.

Текущий rsPIM имеет две основные проблемы, которые необходимо решить в будущем. Во-первых, улучшение разрешения по-прежнему не такое значительное, как у RESOLFT и (F)PALM/STORM. При линейной зависимости скорости переключения от интенсивности возбуждения для rsPIM будет сложно достичь пространственного разрешения, аналогичного STORM.Чтобы решить эту проблему, другая динамика переключения с зависимостью более высокого порядка может помочь улучшить разрешение. В качестве альтернативы можно использовать полиномиальную подгонку более высокого порядка при условии достаточного SNR. Во-вторых, скорость визуализации недостаточна для динамического исследования в реальном времени. Текущий rsPIM обычно завершает цикл переключения от десятков до сотен секунд, что слишком медленно для большинства биологических динамических процессов. Чтобы решить эту проблему, можно увеличить интенсивность возбуждения с повышенным риском постоянного фотообесцвечивания.Уменьшение поля зрения или использование световой подсветки также можно использовать для увеличения скорости визуализации.

Здесь мы должны подчеркнуть, что rsPIM — это метод субдифракционной визуализации, обеспечивающий лишь умеренное улучшение характеристик визуализации, а его наиболее важной особенностью является простота. Тем не менее, конструктивно сравнить rsPIM с другими методами визуализации, использующими rsFP, которые улучшают пространственное разрешение и/или контрастность изображения (таблица 1). По сравнению с RESOLFT и (F)PALM/STORM, rsPIM имеет более низкое пространственное разрешение, но меньшую сложность системы или обработки данных.По сравнению с OLID, rsPIM может не только блокировать сигналы не в фокусе, но и улучшать пространственное разрешение. Однако rsPIM менее чувствителен к слабым сигналам флуоресценции, чем OLID. По сравнению с pcSOFI, rsPIM имеет не только более низкое разрешение и более длительное время визуализации, но и меньшую вычислительную нагрузку. По сравнению с MPDI/MPAI, rsPIM должен обеспечивать лучшее повышение контрастности изображения, поскольку MPDI/MPAI эквивалентен двухфотонному rsPIM первого порядка, хотя MPDI/MPAI не продемонстрировал повышения пространственного разрешения.

Таблица 1

Сравнение методов флуоресцентной визуализации, в которых используется микроскопия с обратимо переключаемым фотоотпечатком (rsFP).

00-300
PAMPING

1
RSOLFIM

1
RSOLFT 5

1

0 (F) Palm / Storm 7 , , 9 9

1

0 OLID 24

1

0 MPDI / MPAI 25
PCSOFI 23
Боковое разрешение (НМ) ~100-150 ~30-50 ~ 10-50 ~250 ~250 ~80-120
Осевое разрешение (НМ) ~ 250 ~30-600 ~ 10-50 ~ 10-50 ~400-500 ~ 300-400-300
Контрастность изображения Высокий Высокий Высокий Высокий Высокий Высокий
Speed ​​ Низкий Высокий Низкий Низкий Высокий Средний
Excitiation Pow э Low Низких Low Низкие Высокие Низкие
Сложности настройки изображения Low High Low Low Низкие Low
Intensity обработки данных Низкий Низкий Высокий Низкий Низкий Средний

В заключение, мы ожидаем, что rsPIM станет доступным в двух биологических лабораториях, где конфокальная микроскопия используется для конфокальной микроскопии.Хотя пространственное разрешение не достигло того, что достигается с помощью STORM, с повышенным разрешением и контрастом изображения rsPIM можно применять для эффективного изображения клеточных мембран и органелл, субклеточных цитоскелетных и ядерных структур, крупных белковых комплексов и хромосом в живых клетках млекопитающих.

Благодарности

Авторы признательны профессору Джеймсу Балларду за внимательное прочтение рукописи. Мы благодарим Lidai Wang, Константина Маслова и Liren Zhu за полезные обсуждения.Эта работа была частично поддержана грантами № EB016986 (Пионерская премия директора NIH), R01 CA186567 (Премия директора NIH за трансформационные исследования), S10 RR028864 и CA159959 (для LVW), а также GM073913 и CA164468 (для VVV) от Национального Институты здоровья.

Ссылки

4. 

J. Humpolickova et al., «Оптическая микроскопия с динамическим насыщением: использование кинетики формирования темного состояния для повышения разрешения». физ. хим. хим. физ., 12 (39), 12457 –12465 (2010).http://dx.doi.org/10.1039/c0cp00059k PPCPFQ 1463-9076 Академия Google

5. 

М. Хофманнет и др., «Преодоление дифракционного барьера в флуоресцентной микроскопии при низкой интенсивности света с помощью обратимо фотопереключаемых белков». проц. Натл. акад. науч. США, 102 (49), 17565 –17569 (2005). http://dx.doi.org/10.1073/pnas.0506010102 PNASA6 0027-8424 Google Scholar

6. 

М. Г. Л. Густафссон, «Микроскопия с нелинейным структурированным освещением: широкопольная флуоресцентная визуализация с теоретически неограниченным разрешением», проц.Натл. акад. науч. США, 102 (37), 13081 –13086 (2005). http://dx.doi.org/10.1073/pnas.0406877102 PNASA6 0027-8424 Google Scholar

14.

Щербакова Д.М.О. М. СубачВ. В. Верхуша, «Красные флуоресцентные белки: передовые приложения для визуализации и дизайн будущего». Ангью. хим. Междунар. Эд., 51 (43), 10724 –10738 (2012). http://dx.doi.org/10.1002/anie.v51.43 ACIEF5 1433-7851 Академия Google

25. 

Ю.Т. Као и др., «Фокусное переключение фотохромных флуоресцентных белков обеспечивает многофотонную микроскопию с превосходным контрастом изображения». Биомед. Опц. Экспресс, 3 (8), 1955 г. –1963 г. (2012). http://dx.doi.org/10.1364/BOE.3.001955 BOEICL 2156-7085 Google Scholar

29.

Янет Ю.Л. и др., «Обратимый оптический контроль флуоресценции цианина в фиксированных и живых клетках: оптическая иммунофлуоресцентная визуализирующая микроскопия с обнаружением блокировки», Филос. Транс.Р. Соц. Лонд. Б биол. наук, 368 (1611), 20120031 (2012). http://dx.doi.org/10.1098/rstb.2012.0031 PTRBAE 0962-8436 Google Scholar

30. 

Х. Чанге и др., «Уникальная серия обратимо переключаемых флуоресцентных белков с полезными свойствами для различных приложений», проц. Натл. акад. науч. США, 109 (12), 4455 –4460 (2012). http://dx.doi.org/10.1073/pnas.1113770109 PNASA6 0027-8424 Google Scholar

Биография

Цзюньцзе Яо получил степень бакалавра и магистра в области биомедицинской инженерии в Университете Цинхуа и защитил докторскую диссертацию в Вашингтонском университете в Сент-Луисе.Луи в 2012 году. В настоящее время он является научным сотрудником Вашингтонского университета под руководством доктора Лихонга В. Ванга. Его исследовательские интересы включают разработку новых методов биомедицинской визуализации, включая фотоакустическую визуализацию, оптическую визуализацию и ультразвуковую визуализацию.

Щербакова Дарья Михайловна — научный сотрудник лаборатории доктора Верхуши. Ее исследовательские интересы включают разработку флуоресцентных зондов и молекулярных биосенсоров и их применение.

Чие Ли получил степень бакалавра биологических наук в 2011 году в Китайском университете науки и технологии в Хэфэй, Китай. В настоящее время он является аспирантом в области биомедицинской инженерии в Вашингтонском университете в Сент-Луисе. Его исследовательские интересы включают применение фотоакустической визуализации в биологических и медицинских исследованиях.

Арье Крамхольц — научный сотрудник в рамках гранта на обучение сердечно-сосудистой биологии на факультете биомедицинской инженерии Вашингтонского университета в Сент-Луисе.Луи. В настоящее время он изучает структуру и функцию потенциалзависимых ионных каналов. Во время работы над докторской диссертацией у профессора Лихонга Вана он сосредоточился на молекулярной визуализации и продемонстрировал пригодность многих генетически закодированных контрастных веществ для использования с фотоакустической томографией, новым методом визуализации, который сочетает в себе оптическое освещение и акустическое обнаружение.

Рамон А. Лорка получил степень бакалавра биологических наук в Католическом университете Чили в 2001 году и защитил докторскую диссертацию в области биологических наук в P.Католический университет Чили в 2008 году. Он начал свою постдокторскую подготовку в лаборатории Мохапатры на факультете фармакологии Университета Айовы с января 2009 года по май 2010 года. Он присоединился к лаборатории доктора Англии в мае 2010 года в качестве постдокторанта.

Эрин Рейнл получила степень бакалавра в 2009 году в колледже Св. Норберта в Де Пере, штат Висконсин. С мая 2009 г. по июль 2010 г. она работала научным сотрудником на кафедре биохимии в Университете Айовы.В мае 2011 года она работала в лаборатории Англии в Университете Айовы, а в январе 2012 года перевелась в Программу молекулярной и клеточной биологии Вашингтонского университета, чтобы завершить обучение в докторантуре.

Сара К. Англия — профессор акушерства и гинекологии в Вашингтонском университете в Сент-Луисе. Ее фундаментальные научные исследования сосредоточены на молекулярных механизмах, лежащих в основе функции матки во время беременности. Она написала множество исследовательских и обзорных статей, а также сделала рецензию для нескольких журналов как в области фундаментальных наук, так и в области медицины.Она входит в состав наблюдательных комитетов нескольких финансирующих агентств, включая Национальный институт здоровья, AHA и Медицинский институт Говарда Хьюза.

Владислав В. Верхуша — профессор Медицинского колледжа Альберта Эйнштейна в Нью-Йорке. Его исследовательские интересы включают разработку флуоресцентных зондов, биосенсоров, скрининга с высокой пропускной способностью и подходов к визуализации.

Лихонг В. Ван — заслуженный профессор Джина К. Беара Вашингтонского университета. В его лаборатории были изобретены функциональная фотоакустическая томография и трехмерная (3-D) фотоакустическая микроскопия.Он является главным редактором журнала биомедицинской оптики . Он был награжден сертификатом OSA C.E.K. Медаль Миса, награда директора NIH за пионерство и награда IEEE в области биомедицинской инженерии.

Невидимый состав «Уорриорз» заставляет остальную часть НБА бояться плей-офф

«Уорриорз» выходят в плей-офф НБА с победной серией из пяти игр. Клэй Томпсон нашел себя, Дрэймонд Грин вернулся в форму, а Джордан Пул продолжает изо всех сил изображать Стефа Карри.

«Голден Стэйт» завершил регулярный сезон со счетом 6:6 в последних 12 играх, а Карри выбыл из игры из-за растяжения связок левой ноги. Двукратный MVP будет переоценен на этой неделе, и его статус в субботней игре 1 против «Денвер Наггетс», скорее всего, станет известен.

Статус Карри, очевидно, будет решающим фактором в том, как долго продлится межсезонье «Уорриорз». Если Карри вернется и будет на уровне 100 процентов или около того, «Уорриорз» следует рассматривать как серьезную угрозу для возвращения в финал НБА.Да, у «Голден Стэйт» есть плохие привычки, от которых нужно избавиться, чтобы строить планы на июнь, но «Уорриорз» всегда казались уверенными в своем чемпионском потолке, когда были полностью здоровы.

Так и должно быть. Среди многих причин для оптимизма в отношении команды 53-29, которая в этом сезоне провела всего 11 минут вместе, является тот факт, что лучший состав «Голден Стэйт» дебютирует в постсезонье.

Среди четырех игроков «Уорриорз», сыгравших вместе не менее 45 минут в этом сезоне, квартет Карри, Томпсона, Пула и Эндрю Уиггинса показал себя наиболее эффективно.

За 63 минуты этого сезона этот состав имеет рейтинг атаки 130,3 и рейтинг защиты 84,3 при чистом рейтинге 46,0. Проще говоря, «Уорриорз» на 46 очков за 100 владений лучше, чем их соперник с этими четырьмя на паркете.

 

Чтобы представить это число в перспективе, этот состав из четырех человек имеет третий лучший чистый рейтинг в НБА, отставая от двух разных квартетов от Minnesota Timberwolves (!), И финишируя на 2,7 балла выше лучшего четверки Milwaukee Bucks. расстановка.

Конечно, глядя на номера составов из пяти человек, вы сможете лучше понять лучший юнит команды. Например, лучшим составом из пяти человек в НБА в этом сезоне, сыгравшим вместе не менее 45 минут, является группа «Бакс» в составе Янниса Адетокумбо, Джру Холидей, Криса Миддлтона, Уэса Мэтьюза и Бобби Портиса с чистым рейтингом 40,9.

Лучший состав «Уорриорз» из пяти человек по чистому рейтингу: Карри, Пул, Виггинс, Кевон Луни и Отто Портер-младший. Однако Грин еще не сыграл ни минуты, когда Карри, Виггинс, Пул и Томпсон все на полу. .

Ожидайте, что этот состав дебютирует после возвращения Карри, и он должен не давать спать другим командам НБА по ночам.

Окружение Карри с тремя снайперами и элитным фасилитатором в зеленом ослабит давление на Карри и заставит команды охранять Воинов до смерти, куда бы ни летел мяч. Прийти, чтобы удвоить или поймать Карри? Заплатите цену. Помочь Виггинсу на диске? Это либо широко открытый трехочковый, либо мяч качается на Пула, Томпсона или Карри для еще лучшего обзора.

СВЯЗАННЫЕ: Лучшие и худшие моменты бурного сезона «Уорриорз»

В воскресенье Томпсон назвал мысль о полностью здоровой команде «Уорриорз» «страшным зрелищем» для остальной части НБА. Трудно найти ошибку в этом заявлении, особенно когда мы не видели лучшее, что могут предложить эти Воины.

С четырьмя снайперами на площадке, двое из которых попали в Зал славы, а еще один стал суперзвездой за последний месяц, «Уорриорз» заставят команды столкнуться с оборонительной дилеммой, решить которую непросто.

У этого состава могут быть проблемы с обороной. Но с Грином на заднем плане и возможностью переключения между Уиггинсом и Томпсоном «Уорриорз» должны быть в состоянии показать этот извилистый состав против большинства противников, которых они увидят в постсезонье.

Если он настолько смертоносен и эффективен, как показывают цифры, он может оказаться главным козырем против элиты НБА.

Скачайте и следите за подкастом Dubs Talk

7 игроков, которые могут оказать влияние на плей-офф Восточной конференции NBA

ХЬЮСТОН, ТЕХАС — 24-ОЕ ОКТЯБРЯ: Грант Уильямс из Бостон Селтикс реагирует после корзины во время… [+] второй тайм против «Хьюстон Рокетс» в Тойота-центре. (Фото Кармен Мандато/Getty Images)

Гетти Изображений

Плей-офф — это время, когда игроки могут сделать себе имя. В центре внимания, и местного телевидения больше не должно быть достаточно, поскольку нация обращается к командам по всей стране.

Не каждый игрок НБА получает внимание Леброна Джеймса, но плей-офф позволяет им на мгновение дать им шанс стать звездой или, на гораздо меньшей ноте, насладиться 15 минутами в центре внимания.

Это упражнение дает нам возможность сосредоточиться на нескольких игроках, которые могут быть немного менее известными, но у которых будет возможность оказать значительное влияние в плей-офф. Мы возьмемся за семь команд, которые в настоящее время должны сыграть в плей-офф Восточной конференции.

Макс Струс

Возможно, есть доля правды в том, что Струс повлиял на стартовый состав. Команда выиграла шесть игр подряд после того, как он был включен в стартовый состав после серии игр, в которых они выглядели совсем не так, как команда, занимавшая первое место в Восточной конференции.В этом сезоне он реализовал более 40 процентов своих трехочковых, что невероятно важно для команды, которая иногда может проигрывать, когда дело доходит до их заключительного состава.

Струс играет в НБА уже третий год и является воплощением успеха организации в поисках талантов. Он представляет те же проблемы, что и Дункан Робинсон, как защитник ниже среднего, но он приложил достаточно усилий ближе к концу сезона, чтобы не быть полной обузой на этом конце площадки.

Грант Уильямс

Уильямс был любимцем всех аналитиков во вселенной НБА, которые считали, что он может стать хорошей мишенью для обмена в различных командах. Он представляет собой более крупное тело, которое может растягиваться на полу и стучать по доскам. Его способность переключаться делает его ключевой фигурой в ротации «Селтикс», особенно сейчас, когда они проигрывают Роберту Уильямсу.

Грант Уильямс — неплохой атакующий подборщик, но его способность к разнице будет заключаться в трехочковых бросках.Кевин Дюрант был одним из лучших защитников в «Нетс» в этом сезоне, и если они решат спрятать его на «Уильямсе», чтобы сохранить его выносливость/использовать его в качестве активного вспомогательного защитника, это может дать игроку ротации третьего года возможность нанести несколько ударов. большие ведра для Селтикс.

Джевон Картер

Картер, возможно, наименее вероятно из упомянутых игроков действительно получит минуты в 1-м раунде. При этом Майк Буденхольцер не боится крутить карусель ротационных игроков, пока не найдет подходящую комбинацию.Картер обладает неоспоримым навыком защитника в точке атаки, и если он сможет использовать достаточное количество открытых трехочковых, он обязательно останется на площадке.

Повтор в финале НБА против «Финикс Санз» может сделать его приоритетом, поэтому команда сможет измотать Криса Пола по ходу серии 48 минут травли в защите. Картер использовал более 50 процентов своих трехочковых бросков с тех пор, как команда подобрала его в феврале. Все, что близко к этому уровню производительности, даст ему реальный шанс стать ключевой частью команды.

Пол Рид

Новости, окружающие Рида прямо сейчас, к сожалению, основаны на видео, которое стало вирусным, на котором Док Риверс «объясняет» свои составы.

Рид выглядел довольно хорошо в последних нескольких играх, которые он заработал, заставляя болельщиков «Филадельфии» требовать меньшего количества ДеАндре Джордана. Его усилия и уровень активности за доской могут иметь большое значение для «Филадельфии». Известно, что команда была раздавлена, когда Джоэл Эмбиид ушел за пределы корта, и если Рид сможет постоять за себя, он сможет решить некоторые проблемы, которые преследовали 76ers в прошлых плей-офф.

Таддеус Янг

Коварный ветеран хорошо играет за «Рэпторс» с тех пор, как в установленный срок был приобретен у «Сан-Антонио Спёрс». Он продолжит быть частью ротации, которая может рассчитывать на его надежность в оборонительной схеме, которая наверняка изменится к моменту.

Наиболее распространенный состав из трех человек, в котором Янг был частью «Торонто Рэптор», включает в себя Криса Бушера и Прешеса Ачиуву. Дикость, которую эти двое привносят в игру, может быть компенсирована постоянным присутствием Янга, особенно с его способностью перемещать мяч в нападении.

Зеленый Хавонте

Грин в течение всего сезона был постоянным игроком ротации «Чикаго Буллз». Это шаг в правильном направлении для 28-летнего футболиста, поскольку он не смог стабильно зарабатывать минуты ротации с момента перехода в НБА в сезоне 2019-2020.

Ему может быть поручено самое сложное задание: охранять Янниса Адетокумбо. Вероятно, «Быки» используют множество различных вариантов, но Грин может быть лучшим выбором для двукратного MVP.Если он сможет что-то изменить, это может дать ему возможность получить некоторую ценность в НБА, поскольку он приближается к последнему году своего контракта.

Брюс Браун

На данный момент Брауна можно считать третьим по важности игроком команды, так что, возможно, мало что будет говорить о том, что он может предложить. Его уровень активности и склонность к тому, чтобы играть из короткого броска, делают его огромной частью того, что делают Нетс. Если он сможет сыграть так же, как против «Кавальерс», «Нетс» могут попасть во 2-й раунд, и этим летом он может получить большую зарплату.

Cavs Notes рассказывает о том, как Эван Мобли провел потрясающий первый год

Если вы обращали внимание на «Кливленд Кавальерс» в сезоне 2021–2022 годов, вы, вероятно, видели, как большой новичок Эван Мобли совершал некоторые вещи в играх. Ну, может быть, больше, чем некоторые.

Мобли, выбранный «Кливлендом» под номером 3 на драфте НБА 2021 года, был всем, чего хотел бы фанат «Кавальерс», и даже больше. В 69 матчах за «Вино и золото» в этом сезоне он набрал 15,0 очков, 8.3 подбора, 2,5 передачи и 1,7 блок-шота за 33,8 минуты за бой. Это не считая поражения от «Бруклин Нетс» во вторник вечером.

7-футовый игрок из Университета Южной Калифорнии оказал огромное влияние на «Кавальерс» в этом году, даже будучи всего лишь 20-летним игроком-первокурсником. Когда смотришь, как он играет, все еще трудно поверить, что он так молод и проводит свой первый сезон в НБА.

Есть еще некоторые области, в которых Мобли должен улучшиться в ближайшие годы, включая силу и оборонительную позицию при подборе, и ему нужно улучшить свою игру в ловлю и бросок (всего 25.0 процентов от трех). Тем не менее, чувак только царапает поверхность того, кем он может стать, и он может стать потенциальной суперзвездой в не столь отдаленном будущем.

Недавно, когда это было до проигрыша «Кливленда» в матче против «Нетс», в котором Мобли по-прежнему набирал 19 очков и два блок-шота, воскресный твит Cavs Notes продемонстрировал, насколько выдающимся было начало карьеры Мобли. И это показывает, как он повлиял на игры множеством способов.

Мобли заканчивает свой сезон новичков с…

1,034 Очков
570 РЭБ (САМЫЕ среди новичков)
174 АСТ
115 BLK (САМЫЕ среди новичков)
56 STL (САМЫЕ среди новичков) https://MOST-doubles
21 т.co/99Lrc6fJ39

— Cavs Notes (@CavsNotes) 10 апреля 2022 г.

Вышеупомянутый твит передает, как у Мобли был потрясающий первый год для Cavs, и у него отличное начало.

Как мы уже упоминали, есть области, в которых Мобли должен стать лучше, чтобы действительно стать звездой в этой лиге. Стрельба из-за дуги — это одно, наряду с усилением, а рост подборов в защите — еще одна область, которой я буду уделять пристальное внимание в следующем сезоне.

При этом Мобли был одной из главных причин того, что «Кавс» повернули в этом сезоне, даже несмотря на их проблемы с травмами.Как упоминалось в приведенном выше твите, он является одним из восьми новичков с 1992 года, набравших более 1000 очков, более 500 подборов, более 150 передач, более 100 блок-шотов и 50 с лишним перехватов. среди какой-то чертовски отличной компании в этом списке.

Мобли, повторяя наше собственное мнение Джона Сучана, должен стать новичком года в НБА, учитывая, насколько он стабилен в течение сезона. Недавно он пропустил отрезок из пяти игр из-за растяжения связок лодыжки, а Кливленд тогда пошел со счетом 1-4.

Конечно, с 6 марта «Кавс» остались без Джарретта Аллена из-за перелома пальца, и это не помогло «Вину и золоту», учитывая, что Аллен значит для этой команды. У него была прорывная кампания в 2021–2022 годах, и он был участником Матча звезд вместе с Дариусом Гарландом.

Что касается Мобли, однако, я не могу переоценить, насколько впечатляющим был большой новичок, учитывая его внутреннюю полировку, касание и небрежность в краске, с его способностями на средней дистанции/затухании, и он был невероятно для новичка в защите.Его переключаемость, защитные качества под кольцом, особенно когда в этом участвовал Аллен, и общий баскетбольный IQ Мобли для 20-летнего игрока часто оказывали огромное влияние.

Как показали Cavs Notes в вышеупомянутом твите от воскресенья, несмотря на то, что Кливленд проиграл Бруклину со счетом 7-8 во вторник, на протяжении всего своего новичка Мобли был действительно бесценным игроком для Кавальерс. Не то чтобы он не давал о себе знать и в той игровой игре.

Излишне говорить, что вышеупомянутый твит подтвердил, что Мобли отлично начал свою карьеру с Wine and Gold, особенно с компанией, в которой он добился этих результатов, и это говорит о том, что в регулярном сезоне Кливленду было 40 лет. -29 в играх, в которых он играл.И наоборот, «Кавс» были всего 4-9 в играх, в которых он не играл.

Наш собственный Джастин Браунлоу до тошноты высказывался о том, что Мобли явно должен быть новичком года, независимо от того, произойдет это в конечном итоге или нет. Скотти Барнс и Кейд Каннингем — другие, казалось бы, соперничающие друг с другом, и они тоже отлично начали свою карьеру.

Независимо от того, считаются ли Сучан, Браунлоу и я предвзятыми фанатами «Кэвс», то, что Мобли сделал в этом сезоне, имело решающее значение для победы.И он — одна из ключевых причин, почему «Кавальерс» улучшили общее количество побед на 22 игры в сезоне 2021–22.

Убегание от Ястребов в несоревновательной игре 1

«Атланта Хокс» и «Майами Хит» встретились в воскресенье днем ​​в Майами в первой игре, о которой аутсайдеры предпочли бы забыть. «Хит» использовала жаркую стрельбу и неустанность, чтобы одержать относительно легкую победу над «Ястребами» со счетом 115–91.

«Атланта» сразу же обнаружила, что оборону команды «Майами» трудно сломать, и это помогало создавать открытые моменты на протяжении всей игры.Майами столкнулся с меньшим сопротивлением на противоположном конце и начал хоронить Ястребов движением мяча и расстоянием. Игра быстро стала неконкурентной и оставалась такой до тех пор, пока милосердно не прозвучал финальный зуммер, когда «Хит» оставалось всего несколько минут в первой четверти до того, как был зафиксирован триумф.

Плохой

Ну, в основном все.

После шаткого старта в атаке обеих команд, «Хит» продолжили игру со счетом 9:0, доведя счет до 16:7, и больше не оглядывались назад. Дополнительная экипировка Майами на обоих концах была очевидна с самого начала.Например, в этом клипе простой задний экран для нападающего Джимми Батлера приводит в действие переключатель, который заставляет Трэя Янга быстро распознать разрез. Это становится двумя легкими очками после неудачной попытки срыва паса.

Майами держал одного или даже двух стационарных стрелков в углах почти на протяжении всей игры, и Макс Струс и Пи Джей Такер были желанными получателями за преимущества, которые они обеспечивали. Здесь, в стороне от слабого пик-н-ролла, ныряющий Дьюэйн Дедмон может выбить Струса, как только Богданович оторвет своего человека, чтобы помочь у кольца.

Хит также любил держать двух стрелков — одного над проломом и одного в углу — на одной стороне пола, чтобы поставить копателя в безвыходное положение. Здесь Лоури может влезть в краску ровно настолько, чтобы Янг остался дома, а Данило Галлинари исчез из ближнего угла, чтобы Такер похоронил одну из своих четырех троек.

И тут в дело вступил смертоносный Дункан Робинсон. Он может быть одним из лучших в лиге, когда он выходит из заслонов по периметру, чтобы получить возможность для своего броска.

Здесь «Ястребы» изо всех сил пытаются сравняться в полупереходе. Посмотрите, как Кевин Хьюэртер пытается вызвать чье-то задание устно и указывая. Оньека Оконгву кусает угрозу Робинсона с тремя мячами и привлекает внимание остальной части защиты «Ястребов». Они не могут восстановиться достаточно быстро, и два паса находят Кайла Лоури с ударом в стиле открытого спортзала.

Хит делил мяч с невероятной скоростью, выбивая из колеи защиту «Хоукс» быстрым движением мяча и заканчивая 35 результативными передачами при 43 забитых мячах — 81 процент.4%.

«Они выступили агрессивно», — сказал Трэй Янг об огненном нападении «Хит» сегодня днем. «Они вышли с большим количеством энергии, они питались энергией толпы, и они просто сделали несколько выстрелов, так что вы тоже должны отдать им должное».

«Я думал, что «Майами» играет на более высоком уровне, — заметил главный тренер Нэйт Макмиллан. «Мы говорили в нашей раздевалке, что в плей-офф есть еще один уровень, на который нужно выйти. Они уже играют с высокой интенсивностью, агрессивностью при каждом владении мячом.Сегодня вечером они показали нам, что есть еще один уровень, на который мы должны выйти, чтобы конкурировать в этих плей-офф».

Данило Галлинари согласился с темой интенсивности, сказав: «Они играли гораздо более интенсивно, чем мы, и мы не были готовы. Они начали с самого начала игры, и мы никогда не соответствовали этому».

«Нам просто нужно было выбраться к стрелкам», — лаконично заметил Де’Андре Хантер. «Это все. Мы позволяем им делать много открытых бросков. В определенные моменты мы немного помогали.Просто достучаться до них — я чувствую, что это ограничило бы количество бросков, которые у них были».

О Тайлере Херро и Дункане Робинсоне он продолжил: «Они оба отличные стрелки. Имея их на полу с такими парнями, как [Батлер] и [Адебайо], вы должны знать о пик-н-ролле и тому подобных вещах. Это создает массу проблем».

В частности,

Robinson обладал лазерной точностью, отрываясь от экранов и легко стреляя. Он набрал рекордные для игры 27 очков всего за 10 попыток с игры, включая множественные фолы у периметра.

Сила и способность к переключению Хит также вызвала приступы у Атланты, а центровой Бам Адебайо вызвал хаос, даже который переключился на Янга. Здесь Адебайо спокойно уступает, а затем ударяет Янга после экрана, чтобы начать быстрый прорыв.

Застой в нападении тоже был очевиден. Возьмите эту игру, где мяч никогда не попадает в краску из-за внимательной высокой защиты от помощи защитников Майами на пик-н-роллах.

Позже, в третьей четверти, Жара продолжала преследовать Янга, даже когда он стоял на месте.Здесь «Ястребы» пытаются устроить пик-н-ролл Делону Райту. Дедмон отлично справляется с тем, чтобы оставаться на хорошей позиции помощника, чтобы позволить Пи Джею Такеру оставаться дома на Галлинари. Когда Такер переключает свое внимание на Янга, когда время для броска становится низким, Кайл Лоури может сделать ставку на кражу, чтобы получить легкий ведро.

«Вот что они делают», — заявил Макмиллан о противниках. «Это очень хорошая оборонительная команда. Все пять парней являются хорошими индивидуальными защитниками, и они связаны как группа.Они установили свою защиту очень рано».

— Ты же знаешь, что это будет воздушный бой, — согласился Джон Коллинз. «[Майами] будет суровым, будет усердно играть, и они будут играть вместе».

В частности, об игре Адебайо Макмиллан подробно рассказал: «Они меняют одного на пятого, своего Бама [Адебайо] из 5 человек. Они уверены, что он может охранять охрану».

«В первом тайме мы проиграли, мы либо забили мяч, либо сделали один пас и удар, — продолжил Макмиллан.«Вы должны быть более терпеливыми, заставить мяч двигаться против их защиты и использовать свой третий и четвертый варианты. Я не чувствовал, что мы сделали это в начале игры».

«Мы видели это на протяжении всего сезона, команды менялись», — ответил Янг в отношении схемы защиты «Майами». «И в нашей последней игре здесь [в Майами] они играют в защите. Так что это не то, чего мы не ожидали».

— Они часто переключаются, — продолжил он. «И не просто переключаются, они делают много ловушек.Вы должны быть готовы прочитать, что они делают, потому что они делают много разных вещей в разное время игры».

На вопрос о том, какое бремя чувствует Янг, выступая против команды с большим количеством переключений, он ответил: «Каждый раз, когда команды ловят ловушки, это обязательно ложится на меня. Я должен убедиться, что мои товарищи по команде находятся в нужном месте. Вернуть [Коллинза] сегодня вечером — это еще один парень, которого я должен ввести в ритм и поток. Но они сделали много ловушек и тому подобного. Так что это больше о том, чтобы доставить парней в нужное место и сделать правильные чтения.Это коллективная единица, когда парень попадает в ловушку».

Временами Атланта генерировала достойные глубокие взгляды, но не могла найти дно сетки с какой-либо частотой. «Ястребы» не помогли себе с 18 потерями, что помогло разрушить любые надежды найти ритм в нападении.

У Янга и Богдановича были кошмарные игры, которые нужно забыть: они завершили игру с общим счетом 1-20 (5%), а 12 из их 14 общих очков были получены с линии штрафных бросков. Однако против меньшей передовой зоны «Майами» Галлинари смог использовать большое тело в средней стойке, чтобы создать пространство для прыгунов с разворота.Он возглавил нападение «Хоукс» без ударов, набрав 17 очков всего за 12 бросков. Но само собой разумеется, что «Атланте» понадобятся их главные звезды нападения, чтобы прийти в норму и вернуться в серию.

Серебряная подкладка

Это игра 1 в пути для Атланты — очевидно, наименее ключевая игра в серии лучших из семи. Всего 40 часов назад «Ястребы» праздновали захватывающую и эмоционально истощающую победу в камбэке в Кливленде, чтобы выйти в плей-офф.

Быстрый поворот и путешествие по пересеченной местности, безусловно, сказались. Точно так же, с учетом того, что Хит занял первое место в Восточной конференции более недели назад и бездействовал в течение недели, у Хит было явное встроенное преимущество, позволяющее прыгать по ничего не подозревающим посетителям с вершины. .

Коллинз также вернулся после двух травм, из-за которых он не выходил на поле с 11 марта, и показал некоторую борьбу, несмотря на физические ограничения. Несмотря на то, что вещатели TNT ожидали от Коллинза 10-15 минут сегодня днем, по возвращении он записал 21 минуту.

«Я чувствовал себя лучше, чем ожидал», — ответил Коллинз о том, каково это было вернуться на пол. «Я чувствую, что адреналин немного взял верх. Очевидно, просто пытается справиться с этим правильно. Убедись, что я выйду туда в наилучшем состоянии. Но я чувствую, что я получил мой ветер. Хотя определенно хочется лучшего результата».

«Это было тяжело», — продолжил он о своем путешествии по выздоровлению. «Очевидно, что из-за травмы пальца, поскольку я правша, а это моя правая рука, это создает немного больше проблем, чем я думал, что у меня обязательно будет.А потом подошвенный фасциит, просто стояние на пятках, просто очень специфические их места явно доставляли мне неприятности».

«Я думал, что [Коллинз] сегодня нам подойдет, — сказал Макмиллан. «Он не играл больше месяца. Это было решение во время игры, поэтому я немного колебался, ставить ли его туда, но я думал, что с ним все в порядке. Он чувствовал себя хорошо. Мы поставили его на запасную пятую позицию. Было приятно снова увидеть его там».

«У него было несколько выстрелов, особенно там, где поздно», — сказал Янг о Коллинзе.«Так что хорошо ввести его в ритм».

Поскольку Клинт Капела, скорее всего, пропустит всю серию, Коллинзу придется активизироваться в передовой зоне «Ястребов», если у «Ястребов» будет шанс изменить свою судьбу в этой серии. Но на пресс-конференции после игры со стороны «Ястребов» не было недостатка в уверенности, и все уверенно ответили, что ситуация изменится. И после последних двух сезонов было бы просто глупо думать, что эта команда сдастся после неудачного дебюта в плей-офф 2021-22.

У «Ястребов» есть еще один шанс добиться раскола, поскольку они снова встретятся с «Хит» в Майами во вторник вечером во второй игре.

Оставайтесь с нами.

.

0 comments on “Переключаемость: Переключаемость — это… Что такое Переключаемость?

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.